##  [Secuenciación de Nueva Generación](/es/node/58450) 

 Definición

Una familia de tecnologías de secuenciación de ADN masivamente paralelas y de alto rendimiento que producen grandes volúmenes de lecturas cortas a largas a partir de bibliotecas de ácidos nucleicos, permitiendo análisis a escala de genoma, transcriptoma y específicos.

 

 

 

 

 

 





## Principio

Principio

Las moléculas de la biblioteca se preparan con adaptadores y a menudo códigos de barras, se amplifican clonalmente o se leen en paralelo y se secuencian masivamente mediante químicas específicas del instrumento que convierten señales bioquímicas en llamadas de bases; la profundidad y la longitud de lectura implican compensaciones entre coste, precisión y resolución.

 

 

 

 

 





## Demostración

Demostración

Re-secuenciación del genoma completo: el ADN genómico fragmentado se convierte en una biblioteca indexada y se secuencia a 30× de cobertura en una plataforma de lecturas cortas para llamar SNPs y variantes estructurales; o bibliotecas de RNA-seq profiladas para cuantificar la expresión génica entre condiciones.

 

 

 

 

## Aplicación incorrecta

Aplicación incorrecta

Sobreinterpretar variantes de baja frecuencia sin evaluar perfiles de error, ignorar efectos de lote en la preparación de bibliotecas, asumir presencia/ausencia con cobertura superficial o emplear ensamblajes de lecturas cortas para resolver repeticiones complejas sin validación ortogonal.

 

 

 

 

 





## Consecuencia

Consecuencia

Permite un perfilado genético y transcriptómico exhaustivo a escalas imposibles con métodos Sanger, impulsando el descubrimiento de variantes, patrones de expresión y comunidades microbianas y guiando la medicina de precisión cuando las canalizaciones analíticas controlan errores y sesgos.

 

 

 

 

## Inversión

Inversión

Si la profundidad de secuenciación es insuficiente, la complejidad de la biblioteca pobre o se ignoran los modelos de error, los conjuntos de datos pueden ser engañosos; la secuenciación Sanger tradicional o ensayos dirigidos pueden ser preferibles para necesidades de alta precisión en un solo locus.

 

 

 

 

 





## Límite

Límite

Cubre plataformas y flujos de trabajo de secuenciación de alto rendimiento para producir y analizar datos de secuencia a gran escala a partir de bibliotecas; excluye métodos capilares de un solo molécule y bajo rendimiento, detección puramente por hibridación sin secuenciación y análisis que carezcan de replicación apropiada y modelado de errores.

 

 

 

 

 





## Tensión semántica

Tensión semántica

Tensión entre enfoques de lecturas cortas de alta precisión y tecnologías de lecturas largas que mejoran la resolución estructural pero pueden presentar diferentes espectros de error; significados en competencia incluyen 'alto rendimiento' frente a 'cualquier secuenciación no Sanger'.

 

 

 

 

 





## Síntesis

Síntesis

La secuenciación de nueva generación agrupa métodos que convierten bibliotecas de ácidos nucleicos en lecturas masivamente paralelas, sopesando longitud de lectura, profundidad y características de error para ofrecer datos a escala genómica y transcriptómica en respuesta a preguntas biológicas diversas.