Medida cuantitativa de la fuerza de interacción entre dos moléculas en equilibrio, comúnmente expresada mediante una constante de disociación de equilibrio (Kd), constante de asociación (Ka) o una energía libre relacionada (ΔG).

Principio

La afinidad de unión está gobernada por el equilibrio de interacciones moleculares (enlaces de hidrógeno, electrostáticos, hidrofóbicos) y la entropía, y se formaliza por la ley de la acción de masas que relaciona las especies ligadas y libres en equilibrio.

Demostración

Determinar Kd con técnicas como resonancia plasmonica de superficie (SPR) que proporciona kon y koff, calorimetría de titulación isotérmica (ITC) o ensayos de equilibrio; informar los valores junto con condiciones experimentales (temperatura, tampón) y, si procede, estequiometría.

Aplicación incorrecta

Interpretar un Kd bajo (alta afinidad) como prueba de especificidad biológica o eficacia sin considerar concentraciones, cinética, avididad o contexto celular; o comparar afinidades medidas en distintas fuerzas iónicas o temperaturas como si fuesen equivalentes.

Consecuencia

Mediciones de afinidad precisas predicen la fracción de formación de complejo a concentraciones dadas, informan la potencia de fármacos, modelos de ocupación de receptores y el diseño de ligandos con velocidades de unión/desunión deseadas.

Inversión

Baja afinidad o unión débil: interacciones con Kd alto que conducen a formación de complejos transitorios o insignificantes a concentraciones fisiológicas.

Límite

Se refiere a la fuerza termodinámica de equilibrio entre socios de unión definidos; excluye descripciones puramente cinéticas salvo que se informen kon/koff y debe distinguirse de la avididad en sistemas multivalentes y de la agregación no específica.

Tensión semántica

Tensión entre afinidad (fuerza termodinámica por sitio) y avididad (unión acumulativa multivalente): una alta avididad puede compensar una baja afinidad por sitio y complicar la interpretación.

Síntesis

La afinidad de unión es la medida de equilibrio de cuán fuertemente interactúan dos socios moleculares definidos; informada como Kd/Ka/ΔG bajo condiciones especificadas, predice la prevalencia del complejo pero debe interpretarse junto con la cinética, la estequiometría y el contexto biológico.